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银水湾论坛会议笔记|张洪亮：我国PRRSV的流行趋势与抗原检测试剂盒研制及应用

一、我国PRRSV的流?趋势

1.非洲猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳�。�、猪流?性泻是�：ξ夜硪底钪饕娜�?疫病。

2.猪蓝耳病主要引起母猪流产和仔猪呼吸道疾�。卑橛胁煌潭鹊募谭⑾妇腥�。

3.欧洲型PRRSV分为4个亚型，其中Western Eouropean Subtype I具有全球流行性。

4.美洲型PRRSV分为9个lineages，其中L1分? PRRSV具有全球流?性，L1、L8分支对我国影响最大。

5.2016年以前是高致病性蓝耳代表的L8分支，2016年以后是NADC30代表的L1分支。

6.L1A变异株（类 30 + HP + 类 34）的出现与流行。

二、PRRSV抗原检测试剂盒研制及应用

1.PRRSV 抗原检测试剂盒研制难点

（1）中国的PRRSV亚型众多，变异快，基因组差异?，很难找到绝对保守的位置。

（2）PRRSV毒株复杂多样，重组复杂，多毒株混合感染现象普遍。

（3）同一类型毒株，序列一致的情况下，基因组二级结构可能存在较?差异。

（4）不同亚型探针序列，与发光/淬灭集团的适配性存在差异。

2.PRRSV检测试剂盒的选择

3.PRRSV检测采样类型

（1）建议死淘猪采扁桃体、颌淋、肺脏。

（2）发病?峰期可以采血或死淘猪采扁桃体、颌淋、肺脏。

（3）流产猪的血及胎?检出?例低，建议送7-21天的同批次弱仔的扁桃体、颌淋、肺脏。

（4）日常检测可以送口?液、脐带血等，我们对日常监测的建议是保留死淘猪的扁桃体、颌淋、肺脏集中送检或随时送检。

4.PRRSV检测试剂盒ct值差异及与病毒载量的关系分析

（1）同一份数据，曲线正常的ct值??与设置有关。

（2）同一款试剂盒更换酶（尤其是自研试剂盒）或者荧光定量PCR

仪对ct值及曲线的形态均会产?较?影响。

（3）对于同一款批次稳定的试剂盒，其ct值的??与病毒载量有关

（纵向?较），不同试剂盒之间没有可?性（横向?较）。

5.PRRSV检测试剂盒ct值与测序

（1）ct值，病毒载量?，就一定能测序吗？

①不同试剂盒CT值没有可?性，他家ct值35可以测出来，你家ct值30也未必测出。

②ct值�。俏薹ú庑颍懦�?为因素，可能存在以下三?原因：一是存在非特异性过高；二是测序引物与当前毒株不匹配；三是普通PCR所用酶的敏感性不够。

（2）我们研究的一款美洲型和欧洲型一步法荧光RT-PCR试剂盒ct值与测序的关系：ct≤30测序率接近100%；30<ct≤35测序率约40%；

35<ct≤38测序率不?10%（配套4+2+N测序引物）。

6.PRRSV测序解读-毒株类型判断

（1）如果能够获得PRRSV的全基因组，对毒株类型的判断相对?较准确。

（2）而多数情况下，我们只获得了PRRSV的部分基因，如NSP2部基

因、ORF5、ORF7基因等。那如何更好的判断猪场的毒株类型呢？

①NSP2+ORF5/ORF7：?概率能够反映这个毒株类型。

②NSP2/ORF5/ORF7之一：只能是粗略判断毒株类型。

三、结论

1.我国的PRRS呈现美洲型和欧洲型双基因型以及多个亚型共存的局面。我国的美洲型PRRSV 呈现“30+”、欧洲型PRRSV呈现基因组“差异?”、猪场内PRRSV呈现多毒株“混合感染”的新特点。

2.PRRSV抗原检测试剂盒研制难度?，不同试剂盒之间的差异?，选择合适的试剂盒，并正确运用，为猪场PRRSV的监测及防控助力。

会议笔记由哈尔滨22bet·(中国)官方网站科技股份有限公司曹野记录整理。

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